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酶聯(lián)免疫實驗操作中復測問題分析

㈠標本問題

要嚴格規(guī)范正確處理樣本,預防血漿層大規(guī)模溶血和異物,使用一次性采樣槍頭,避免交叉污染。血清和血漿均可用于檢測,但血清的分離應在血液完全凝固后進行離心操作。

 

㈡試劑問題

保存并正確使用有效試劑。與金屬容器接觸的過期試劑和底物的使用,以及底物混合后較長的儲存時間都影響實驗結果的準確性。中海選擇試劑時,應選擇靈敏度高\特異性好\穩(wěn)定性好\批間差異小的試劑。不同制造商的試劑不應混合,包括底物和洗滌液。測試前,獸用診斷試劑應在室溫下放置半小時進行平衡,現(xiàn)在應準備好清洗液。同時中海生物觀察濃縮清洗液中是否有結晶。如果有結晶,放入三十七度的水浴中融化后再使用。

 

㈢操作問題

嚴格按照相關實驗室的標準操作規(guī)程進行試驗。中海生物技術人員添加樣品時,盡可能垂直添加樣品,并將其添加到涂層孔的底部。注意:不要過度用力破壞底部涂層材料,也不要將其添加到孔的上部和外部。

 

㈣溫浴問題

當水浴箱用作溫水浴裝置時,應注意水深對結果的影響。當水浴箱中水的實測溫度為三十七度時,水面溫度可能只有三十四度,空氣溫度更低,甚至只有二十多度。因此當水浴箱內水位過低時,酶標微孔板不會浸入水中,反應溫度不會達到三十七度,會相應影響酶促反應。為了防止邊緣效應,酶聯(lián)免疫吸附試驗板應盡可能浸入水中,從而保證加熱均勻。水浴中,海應密封酶聯(lián)免疫吸附試驗板,防止水滴滴入包被孔或陽性樣品蒸發(fā)。嚴格控制暖浴時間,不要為了早出效果而隨意縮短暖浴時間。

 

㈤洗板機問題

廢液瓶裝滿后要及時倒空,防止廢液回流污染管道,導致沖洗不徹底,容易出現(xiàn)花板。洗完板后用蒸餾水徹底清洗管道,防止廢液殘留在管道內。同時應根據(jù)中海儀器維護程序定期維護洗衣機。

 

㈥酶標儀問題

酶標儀應放在遮陽避光的地方,比色前應打開預熱十五至三十分鐘,這樣測定結果會更穩(wěn)定。為防止顯色加深或減弱,顯色時間結束后應立即滴止液,避免產生氣泡,十分鐘內完成比色。將酶標板從水浴箱中取出后,擦去孔底的水滴。如果有水滴或紙屑殘留在孔底,酶標閱讀器的讀數(shù)就會出現(xiàn)錯誤,往往被誤判為花板。


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