豬瘟是中國主要的動物疫病。我國對豬瘟的防控主要采取豬瘟疫苗免疫策略，抗體檢測是評價免疫效果的主要手段。目前，世界動物衛(wèi)生組織推薦的豬瘟抗體檢測方法為ELISA檢測法和熒光抗體中和試驗。熒光抗體中和試驗對試驗條件和操作人員要求高，耗時長。它只適合專業(yè)實驗室檢測少量樣本，不適合推廣應(yīng)用。因此，可以說，ELISA是國際公認(rèn)的*適合大規(guī)模應(yīng)用的豬瘟抗體檢測方法。
在評估ELISA檢測方法時，兩個最重要的指標(biāo)是敏感性和特異性，兩者之間存在一定的矛盾。當(dāng)檢測方法的靈敏度高時，它必然會失去某些特異性；同樣，當(dāng)特異性要求高時，它必然會失去一些敏感性。因此，對于一個好的檢測方法，我們必須找到靈敏度和特異性的*平衡點和結(jié)合點。目前，用于豬瘟抗體檢測的ELISA方法主要有阻斷ELISA和間接ELISA兩種原理。阻斷ELISA使用單克隆抗體，因此檢測的特異性更高；間接ELISA更注重敏感性。
阻斷ELISA和間接ELISA在實際應(yīng)用中都是合理的。然而，鑒于我國豬瘟大規(guī)模強制免疫的現(xiàn)狀，如何在不同應(yīng)用領(lǐng)域選擇合適的試劑盒成為一個重要問題。因此，本文主要介紹了間接ELISA試劑盒與進口阻斷ELISA試劑盒在臨床應(yīng)用中的比較研究，以幫助讀者在實際生產(chǎn)中選擇更合適的檢測試劑。
試劑盒開發(fā)原則的差異
阻斷試劑盒基于液相阻斷原理，反應(yīng)孔的顏色與血清中的抗體含量成反比。阻斷ELISA使用單克隆抗體檢測，可以大大提高檢測的特異性，但實際檢測對象僅針對具有單一表位的抗體（作為特異性抗體檢測）。因此，當(dāng)陽性血清中針對該表位的抗體的豐度不高時，檢測的靈敏度會降低（會出現(xiàn)假陰性結(jié)果）。
間接試劑盒基于間接ELISA原理。反應(yīng)孔的顏色與反應(yīng)板中結(jié)合的特異性抗體的量成正比。因為間接ELISA檢測針對抗原蛋白的多克隆抗體（豬體內(nèi)的總抗體），它將提高檢測的靈敏度。
兩種試劑盒與熒光抗體病毒中和試驗的符合率分析
熒光抗體病毒中和試驗（FVNT）是OIE推薦的方法，也是檢測豬瘟抗體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。一項臨床試驗表明，兩種ELISA抗體檢測試劑盒檢測結(jié)果不同的283份血清樣本均通過FVNT法進行了確認(rèn)和測試。結(jié)果表明，間接試劑盒與FVNT的符合率為69.26%，阻斷試劑盒與FVNT的符合率是28.62%。不符合樣品的確認(rèn)結(jié)果表明，直接試劑盒能夠更真實地反映接種后的中和抗體水平，而阻斷試劑盒對陽性血清的檢測有明顯的遺漏。