酶聯(lián)免疫診斷技術(shù)的發(fā)展

酶聯(lián)免疫吸附診斷技術(shù)是以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）為基礎(chǔ)的測(cè)定技術(shù)。由于抗體可以高度特異與抗原分子結(jié)合，因此通過(guò)抗原-抗體的特異性識(shí)別反應(yīng)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)就可以成為一種簡(jiǎn)便的檢測(cè)程序。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，創(chuàng)始于1971年，當(dāng)時(shí)，瑞典學(xué)者Engvail和Perlmannn，荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報(bào)道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法，稱(chēng)為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。1974年Voller等又將固相支持物改為聚苯乙烯微量反應(yīng)板，使ELISA技術(shù)得以推廣應(yīng)用。ELISA是免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用最廣，最有發(fā)展前途的一種技術(shù)，可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。

最初發(fā)展的免疫酶測(cè)定方法，是使酶與抗體或抗原結(jié)合，用以檢查組織中相應(yīng)的抗原或抗體的存在。后來(lái)發(fā)展為將抗原或抗體吸附于固相載體，在載體上進(jìn)行免疫酶染色，底物顯色后用肉眼或分光光度計(jì)判定結(jié)果。

酶聯(lián)免疫測(cè)定方法及原理

酶免疫測(cè)定方法的基本原理是：先將已知的抗體或抗原結(jié)合在某種固形載體上，并保持其免疫活性。測(cè)定時(shí)，將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同步驟與固相載體表面吸附的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)。用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離成分。然后加入底物顯色，根據(jù)顏色深淺進(jìn)行定性或定量測(cè)定。

自1971年酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)建立以來(lái)，其技術(shù)已經(jīng)日趨成熟，最經(jīng)典的當(dāng)屬Clark和Adams于1977年建立的雙抗原夾心法。后來(lái)人們又建立了許多改進(jìn)的方法，成功地用于病毒的檢測(cè)與鑒定。根據(jù)檢測(cè)目的和操作步驟的不同，常用的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法有兩種類(lèi)型。用于測(cè)定抗原的技術(shù)類(lèi)型有雙抗體夾心法、雙位點(diǎn)一步法和競(jìng)爭(zhēng)法；用于測(cè)定抗體的技術(shù)類(lèi)型有間接法、雙抗原夾心法和競(jìng)爭(zhēng)法。此外，還有捕獲法。